【母婴新闻】基因工程技术在乳糖酶生产中的应用

利用基因工程技术，可以将高活性的乳糖酶基因引入到易于培养和快速生长繁殖的微生物中，从而大大降低成本。如domingues等人利用酿酒酵母和黑曲霉中编码胞外乳糖酶的laca基因构建重组菌株，使重组酿酒酵母菌株分泌乳糖酶，乳糖酶能高效利用乳糖。为了提高酶的产量和质量，经常使用定点诱变、原生质体融合和dna重组技术(domingues l等人，2000)。

Ibrahim等人利用化学诱变剂对双歧杆菌、乳杆菌和嗜热链球菌两个菌株进行突变，进而筛选高产菌株。与它们各自的野生型菌株相比，诱变菌株的产酶量显著增加，与野生型菌株相比，长双歧杆菌诱变菌株的产酶量增加了2倍以上(ibrahim s a .等人，2000)。为了进一步获得高产菌株，新的基因工程菌不断出现。大肠杆菌和酵母是产生酶的主要工程菌，此外还有嗜热链球菌和乳酸杆菌。乳糖酶基因lac4通过pcr扩增从乳酸克鲁维酵母基因组获得，克隆到大肠杆菌表达载体pet-28a(+)，并在大肠杆菌bl21中表达。酶活达到44.78 u/ml(徐顺庆等，2010)。

此外，一些研究人员探索了突变基因对乳糖酶产生的影响。以前的研究发现，硫杆菌的突变体f441ye产生β；-半乳糖苷酶可以提高低聚半乳糖的产量。然而，由于大肠杆菌表达系统的一些特性，如包涵体形成和复杂的过程控制技术，孙晓军等人通过pcr扩增该突变基因并在毕赤酵母中表达，并优化了生产低聚半乳糖的工艺条件(孙晓军等人，2014

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